在超低溫冷凍狀態(tài)下長期保存細(xì)胞的方法。細(xì)胞生化活動(dòng)的速率與絕對(duì)溫度呈正比,在-176℃的超低溫下,細(xì)胞呈休眠狀態(tài),因而能長期保存。細(xì)胞在冷凍時(shí),常因溶液中電解質(zhì)濃度增高和冰晶形成而受到損傷,故凍存細(xì)胞須懸浮于無毒、低分子量、高溶解度,并能迅速透入活細(xì)胞內(nèi)的特定保護(hù)劑中,如甘油、二甲亞砜、聚烯吡酮、葡萄糖等,其中前兩種最常用。冷凍過程中的降溫速度對(duì)冰晶形成有重大影響,冷凍速度太快,則細(xì)胞外結(jié)冰時(shí),細(xì)胞內(nèi)水分來不及滲出胞外,以致在胞內(nèi)形成冰晶,損傷細(xì)胞; 如冷卻過慢,則細(xì)胞外溶液結(jié)冰,時(shí)間過長,引起細(xì)胞內(nèi)水分大量滲出,細(xì)胞收縮死亡。適中的 ......
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